枇杷ISSR扩增反应体系的优化
Optimization of ISSR reaction system for species of Loquat (E.japonica Lindl.cv)
摘 要:采用正交设计对影响枇杷ISSR-PCR的模板DNA、dNTPs、Primer、Taq酶及Buffer(含Mg2+)进行优化。试验结果表明:20 μL反应体系中,含模板DNA 5 ng、dNTPs 0.25 mmol/L、Primer 0.25 μmol/L、Taq酶 0.5 U和10×Buffer(含Mg2+) 3 μL。此外,从95条ISSR引物中筛选出11条具有丰富的多态性位点的引物,同时优化各引物退火温度。
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