西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用

焦楠, 朱宁, 程春振, 林玉玲, 李汉生, 陈发兴, 赖钟雄

果树学报. 2019, 36(07): 947-953

果树学报 ›› 2019, Vol. 36 ›› Issue (07) : 947-953. DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20190012
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西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用

  • 焦楠, 朱宁, 程春振, 林玉玲, 李汉生, 陈发兴, 赖钟雄
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摘要

【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus, TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L~(-1)和8.0 mmol·L~(-1);最佳退火温度为57℃;最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示,在样品c DNA原液稀释到10-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。

关键词

西番莲 / 夜来香花叶病毒 / 黄瓜花叶病毒 / 病毒检测 / 双重RT-PCR技术

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焦楠, 朱宁, 程春振, 林玉玲, 李汉生, 陈发兴, 赖钟雄. 西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用. 果树学报. 2019, 36(07): 947-953 https://doi.org/10.13925/j.cnki.gsxb.20190012

基金

福建省高原学科建设经费(102/71201801101); 福建农林大学水果产业乡村振兴服务团队项目(102/69914001003)

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