【目的】降低传统化学试剂提取而带来的毒性大风险,试用简便、温和、环保又高效的木瓜蛋白酶法、超滤膜法等分离纯化柿子总多糖提取物(TPs PF)。【方法】以当季成熟‘牛心柿’果实为试材,探讨了木瓜蛋白酶脱蛋白过程中不同处理工艺对TPs PF保留率和蛋白质去除率的影响,并进一步选择MWCO为200/10 ku的超滤膜截留收集分子质量10~200 ku的目标多糖组分,以超滤膜通量和TPs PF截留率为评价指标筛选出超滤工艺条件。【结果】TPs PF木瓜蛋白酶法脱蛋白优化工艺参数:酶用量1.0%,温度60℃,处理时间1.5 h,p H值6或7。其中对TPs PF保留率影响较大的因素是处理时间,而对蛋白质去除率影响较大的则是p H值。超滤膜富集分子质量10~200 ku的TPs PF的优化工艺条件:压力0.3 MPa,温度30℃,初始多糖浓度20 g·L~(-1),最后得到TPs PF截留率为(45.82±2.37)%。【结论】试验中的脱蛋白酶法、超滤法等生物分离方法操作简便,温和并获得了较高的提取率,适合于TPs PF的分离提取,并为下一步药理作用的评价提供了物质基础。