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  • 刘秋瑾, 白长胜, 尹珺伊, 田秋丰, 王欢, 张军, 王岩, 薛沾枚, 苗艳, 曹禹, 金振华
    畜牧与饲料科学. 2024, 45(3): 1-10. https://doi.org/10.12160/j.issn.1672-5190.2024.03.001
    [目的]研究伊春森林猪源植物乳杆菌的生物学特性,全面评价其在益生菌制剂开发方面的应用潜力。[方法]对分离自黑龙江省伊春市健康森林猪粪便的1株乳酸菌(P1M1株)进行生化鉴定,利用细菌16S rDNA序列PCR扩增及测序技术进行分子生物学鉴定。绘制菌株生长曲线及产酸曲线,评价菌株对酸(pH值为2.0、3.0、4.0)和胆盐(浓度为0.15%和0.30%)的耐受性,考查菌株对13种抗菌药物的敏感性及其对猪源金黄色葡萄球菌的抑制作用,测定菌株的自由基清除能力及胞外多糖产量,评价菌株对小鼠的安全性。[结果]结合生化鉴定结果和分子生物学鉴定结果,将P1M1株鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,L. plantarum)。L. plantarum P1M1株具有糖酵解能力;培养2~10 h为对数生长期,18 h后培养基pH值稳定在3.8~3.9;在pH值为2.0、3.0、4.0条件下的3 h存活率分别为(48.97±0.61)%、(64.19±0.94)%、(78.44±1.36)%,在0.15%和0.30%胆盐浓度下的3 h存活率分别为(53.86±1.14)%、(32.87±0.75)%;对红霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、妥布霉素、氨苄西林、阿莫西林、头孢哌酮、头孢拉定、头孢他啶敏感;对猪源金黄色葡萄球菌表现出明显的抑制作用;无细胞上清液对DPPH自由基、羟自由基、ABTS自由基的清除率分别为(91.65±1.44)%、(87.32±0.22)%、(89.79±0.59)%,均显著(P<0.05)高于完整细胞菌悬液;胞外多糖产量为(796.73±2.43)mg/L;小鼠连续灌胃L. plantarum P1M1株2周后,未见死亡及器官病变。[结论]森林猪源L. plantarum P1M1株进入对数生长期快,具有糖酵解特性和较强的产酸能力,耐受酸和胆盐,对多种抗菌药物敏感,可抑制猪源金黄色葡萄球菌生长,抗氧化能力强,胞外多糖产量高,对小鼠具有安全性,可作为益生菌制剂开发的候选菌株。
  • 陈海燕, 陈娟, 李永琴, 马春芳, 张慧宁, 杨俊华, 杨奇
    畜牧与饲料科学. 2024, 45(3): 11-19. https://doi.org/10.12160/j.issn.1672-5190.2024.03.002
    [目的]建立同时检测配合饲料中64种药物的超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry,UHPLC-MS/MS)法,提高非法添加物的检测效率。[方法]采用Waters HSS T3型色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm)进行分离,流动相A为0.1%甲酸水溶液,流动相B为含0.1%甲酸的乙腈溶液,梯度洗脱,流速为0.40 mL/min,进样量为2 μL;采用电喷雾离子源正离子扫描模式进行检测,多反应监测模式进行信号采集。比较4种样品提取溶剂以及2种固相萃取柱处理对目标药物的回收率,确定样品前处理的最佳方法。利用建立的UHPLC-MS/MS法对宁夏回族自治区不同来源的100批次配合饲料样品进行64种药物检测。[结果]配合饲料样品均质后,用含0.2%甲酸的乙腈水溶液(乙腈∶水=8∶2,V/V)提取,利用Oasis PRiME HLB型固相萃取柱对样品净化,多数目标药物的回收率在60%以上。64种药物在浓度为5.0~200.0 μg/L的范围内线性关系良好,相关系数(R)均大于0.99;不同药物的定量限在5.0~10.0 μg/kg;阳性添加5.0、20.0、50.0 μg/kg 3个浓度的平均回收率在41.00%~120.49%,批内相对标准偏差(RSD)在0.54%~15.94%,批间RSD在1.25%~13.64%。在100个批次的配合饲料样品中均未检出目标药物。[结论]建立的UHPLC-MS/MS法线性关系良好、回收率高、精密度好,具有较高的重现性和较好的可操作性,可用于配合饲料中非法添加64种药物的筛查。
  • 刘向敏, 徐海生, 卢媛, 王晓东, 赵称赫
    畜牧与饲料科学. 2024, 45(3): 20-26. https://doi.org/10.12160/j.issn.1672-5190.2024.03.003
    在畜禽饲料端“禁抗”的背景下,生物饲料作为抗生素替代产品备受关注。生物饲料具有改善饲料品质以及提高动物生产性能、提升动物免疫力、调节动物肠道菌群等功能,市场接受度日益提高。介绍了生物饲料的定义和分类,以发酵饲料和菌酶协同发酵饲料为例,综述生物饲料在牛、羊、猪生产中的应用研究进展,分析当前生物饲料应用存在的问题并提出相关建议,以期为生物饲料的开发及应用提供参考。