重组牛疱疹病毒1型转移载体的构建与初步应用

戴莎莎, 马小静, 王景松, 田兴苗, 王健霖, 李继东

浙江农业学报. 2023, 35(10): 2311-2320

浙江农业学报 ›› 2023, Vol. 35 ›› Issue (10) : 2311-2320.

重组牛疱疹病毒1型转移载体的构建与初步应用

  • 戴莎莎, 马小静, 王景松, 田兴苗, 王健霖, 李继东
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摘要

为构建一种能用于牛疱疹病毒1型(BHV-1)重组的转移载体，在真核表达载体pVAX1 CMV(cytomegalovirus)启动子的反向位点插入另一个CMV启动子，构建具有双向启动功能的表达载体prPP,在正、反向CMV启动子下游预置多克隆酶切位点；将绿色荧光蛋白标记基因置于反向启动子下，构建BHV-1重组载体prPgP;以BHV-1囊膜糖蛋白基因gE作为重组位点，将gE上下游同源臂插入prPgP载体中，牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E2基因置于正向CMV启动子下，构建p△gErPgP-E2载体，用重组质粒转染已感染BHV-1的牛肾细胞(MDBK),产生的重组病毒经筛选、纯化、鉴定，命名为rBHV-1-△gE/E2,所含GFP和E2基因正常表达。结果表明，重组载体prPgP能方便地用于BHV-1的重组，为相关研究及其疫苗研制提供了便捷。

关键词

牛疱疹病毒1型 / 同源臂 / 转移载体 / 同源重组

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戴莎莎, 马小静, 王景松, 田兴苗, 王健霖, 李继东. 重组牛疱疹病毒1型转移载体的构建与初步应用. 浙江农业学报. 2023, 35(10): 2311-2320

基金

宁夏自然科学基金(2022AAC03075); 宁夏回族自治区重点研发计划(2019ZWSF3007,2022BBF03024)

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